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15 ATAC-seq基础分析
1. ATAC-seq和chip-seq不一样的地方: --no-mixed 不允许一个reads比对上,另一个比对不上。要么一对都比对上,要么都比对不上。 --no-discordant允许的插入片
14. ATAC-seq原理
1. 绝大部分染色质处于浓缩在一起的、封闭的状态,少数的2%、3%的区域处于开放状态。 2. 核小体占据、核小体定位 2.1 DNA缠绕在核小体上,核小体到底位于DNA的什么地方呢? 答:假如有一个细
13. 组蛋白修饰需要注意的细节
如果做的是broad peak应该注意的细节 在参数设计的时候要注意: 转录因子,全部是narrow peak; 如果是组蛋白就对着这一表格查阅: broad peak其实是一个一个的narrow p
12. ChIP-seq质控
1、测序数据量(这里是fastp报告) 整体上来说,测序的数据量一般是没有问题的,数据质量一般是没有问题的,Q30的值非常高,过滤前的数据和过滤后的数据相差不多,没过滤掉多少。说明整个数据的质量通常是
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1.上一步得到的差异peaks(merge后), be like: 2.peaks注释(merge后的): 提取基因做富集分析,见tutorial book。
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8. Peaks定量与差异分析
单样本:比如有一个脱落酸处理的样本,想研究ZAT6这个转录因子在脱落酸处理的样本中是一个什么情况,它有哪些结合位点,这些结合位点位于哪些基因的附近。 多样本:有时候样本可能是分组的,有一组样本是用脱落
7. 使用UROPA进行peaks注释
peaks注释 1.寻找最近基因 如果是H3K4me3,则应该计算peak中心到TSS的距离。 如果是H3K36me3,则应该计算peak中心到gene center的距离。 如果是H3K4me1,则
6.1 使用ChIPseeker进行peaks注释
选择UROPA的原因 目前所有主流软件都有一个问题,都当作转录因子结合在promoter区域来解决问题。 算距离的时候,所有软件分成2个步骤,首先看peak离哪个基因最近,找到基因TSS位点最近的,不
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