13. 组蛋白修饰需要注意的细节

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如果做的是broad peak应该注意的细节

  • 在参数设计的时候要注意:

转录因子,全部是narrow peak; 如果是组蛋白就对着这一表格查阅: image.png

  • broad peak其实是一个一个的narrow peak组合在一起的。

流程中注意的地方:

  • 在过滤peaks这一步,重复样本之间,将peak合并在一起,idr对narrow peak效果好,对broad peak效果不好,所以broad peak就用intersect这种方法。 image.png

  • --broad参数 image.png

  • 组蛋白不做motif特征分析 组蛋白是缠绕在核小体上的,没有motif特征。

  • uropa注释

转录因子可能只需要对start进行定位,[3000, 500]或[2000, 500]来设置。

image.png

分析结果的差异

  • broad peak没有第十列; image.png broad peak文件和narrow peak文件几乎没有差异,只有最后一列有差异。

image.png

  • broad peak由narrow peak连接起来的;

会产生另外一个文件:

image.png

用igv查看:

image.png

  • cut&tag cut&tag相比于chip-seq而言,cut&tag信号非常强。 chip-seq背景噪音太强了,人眼无法判断有peak还是没有peak,只能让软件判断;cut&tag则可以人眼判断。