实验protocol参考丁香园：细胞传代培养实验-细胞传代培养（悬浮、贴壁）-丁香实验
实验操作参考中洪博元：bing.com/videos
相信很多医学生做实验都用到细胞，那么今天我们就来讨论研究一下细胞传代传代的目的，原理，所需试剂和仪器及注意事项吧。
细胞传代（也称细胞传递或细胞传培养）是在体外培养中将细胞从一个培养瓶或培养环境转移到另一个环境的过程。为了保存细胞，也为了培养细胞扩大细胞数量以便进行各种实验，细胞传代是必不可少的。
目的
- 扩大细胞数量：通过传代，可以获得更多细胞，以便进行后续实验和研究。
- 保持细胞活性：细胞在培养时会消耗培养基中的营养物质，并产生代谢废物。通过传代，可以为细胞提供新的培养基，保持其活性和生长状态。
- 分离单个细胞：在某些情况下，传代可以用于分离单个细胞，以便于克隆或获得特定的细胞群体。
- 研究细胞生物学特性：细胞传代允许研究人员在控制条件下观察细胞的生长特性、分化和其他生物学特性。
原理
- 细胞生长：细胞在适当的条件下不断分裂和增殖，从而达到一定的细胞密度。
- 酶解：在细胞传代过程中，通常使用胰蛋白酶或胶原酶等酶来消化细胞间的连接，使细胞从培养基及培养瓶表面分离。
- 培养基更换：转移后，添加新鲜的培养基，为细胞提供必要的营养成分和生长因子。
细胞在培养瓶长成致密单层后达到一定密度饱和后，为使细胞能继续生长和扩大细胞数量，就需要进行酶解使细胞分离，并添加培养基给补充营养让细胞更好的生长。
所需试剂和仪器
- 无菌细胞培养瓶
- 胰蛋白酶（或其他消化酶）
- 培养基（适合细胞类型）
- 生物安全柜
- 离心机（视情况而定）
- 移液器和移液管
- 无菌试管
操作注意事项
1.细胞传代需要无菌操作，试管，枪头等需要灭菌使用。
2.并且操作前要洗手更换拖鞋，进入超净台前要用 75% 酒精擦拭消毒，试剂等瓶要 75% 酒精喷浴后才能放入超净台 。
3.不同细胞和不同操作之间需要换枪头，弃液体时最好悬空，不要碰到垃圾桶壁，避免污染。
4.细胞长势在显微镜下70-80%较好，不宜太密或太少。
5.注意插枪头，加液体等操作时手不要从培养基上方过，可以绕开。
6.消化时间不宜过长或过短，消化时间过短细胞不易从瓶壁脱落，过长细胞可脱落流失。
7.实验结束时，用酒精擦拭超净台，封口膜封口如培养基和胰蛋白酶，清理垃圾桶。
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