蛋白的氨基酸序列测定是指确定蛋白质分子中氨基酸的精确排列顺序的过程。以下是关于氨基酸序列测定的基本介绍:
一、方法:
1、Edman 降解法:
由Pehr Edman于1950年代开发,它依次去除蛋白质的N-末端氨基酸并鉴定其身份。这种方法可以连续确定大约50个氨基酸的序列,但对于更长的蛋白质需要其他策略。
图1
2、质谱法:
利用质谱仪来鉴定蛋白质或其裂解片段的质量,从而推断氨基酸序列。质谱法用于蛋白质序列分析,较Edman降解法而言,其优点在于,质谱法更敏感,可以更快地裂解肽,可以识别末端封闭或修饰的蛋白质。
图2
二、应用:
1、功能研究: 了解蛋白质的氨基酸序列可以帮助研究者预测蛋白质的功能和结构。
2、进化研究: 通过比较不同物种中的蛋白质序列,研究者可以了解物种间的亲缘关系和进化模式。
3、疾病研究: 某些遗传性疾病是由蛋白质序列的突变引起的,通过测定蛋白质序列可以诊断和研究这些疾病。
三、局限性:
1、Edman 降解法对长序列的测定存在局限性。
2、质谱法需要先进的仪器和复杂的数据分析。